产品货号：
JN0029
中文名称：
全血DNA聚合酶
英文名称：
BloTaq DNA Polymerase
产品规格：
400U|2000U
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
BloTaq DNA聚合酶是截短后的Taq DNA聚合酶，它缺失了5'→3'外切酶活性。BloTaq DNA聚合酶还存在其它突变，这些突变使它能够耐受全血样品中存在的抑制剂。该酶能够扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先提纯，在25μL反应体系中能够耐受高达10%的全血。在大多数抗凝剂存在下，包括肝素、柠檬酸和EDTA等，BloTaq DNA聚合酶依然扩增性能良好。
- 扩增未加抗凝剂的血液样本；
- 扩增添加了肝素、柠檬酸、EDTA等抗凝剂的血样样本；
- 血液基因组扩增检测。
- 简便：直接用血液为模板扩增目的基因，无需事先提纯。
- 高效：多数抗凝剂存在条件下，抗抑制能力强，能有效扩增。
| 组分 | 400U | 2000U |
| BloTaq DNA聚合酶(4U/μL) | 100μL | 100μL×5 |
| 5×BloTaq Buffer with Mg2+ | 1mL | 1mL×5 |
| dNTPs (10mM each) | 200μL | 200μL×5 |
保存：-20℃
在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTPs的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
经多次柱纯化，SDS-PAGE检测纯度大于95%，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
- 2mM Mg2+可以满足绝大多数PCR扩增，对于某些PCR，为了保证较好的扩增，可调节为2～4mM。
- 体系中加入推荐的酶量，可以满足大多数PCR扩增，对于某些PCR，为了得到较好的扩增，可适当增加酶量。
图1.以人全血样品为模板，
分别用BloTaq和Taq DNA聚合酶进行扩增。
泳道1-4使用BloTaq DNA聚合酶
泳道5-8使用Taq DNA聚合酶
泳道1，5：10%血液+Na-EDTA；
泳道2，6：10%血液+K-EDTA；
泳道3，7：10%血液+Na-肝素；
泳道4，8：10%血液+Na-柠檬酸；
泳道M：DNA Ladder 2000。
- 常用反应体系（25μL）
成分 用量 5×BloTaq Buffer with Mg2+ 5μL 上游引物 0.2～1.0μM（终浓度） 下游引物 0.2～1.0μM（终浓度） dNTPs (10mM each) 1μL 全血 0.1～2.5μL BloTaq DNA聚合酶(4U/μL) 1μL (4U) ddH2O 至25μL - 推荐PCR反应程序
- 当扩增片段＜3K：
循环数 温度 时间 1 94℃ 90s 30 94℃ 20s 55～60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段＜3K：
相关搜索：全血DNA聚合酶，DNA聚合酶，全血DNA，血液DNA，免提取，DNA扩增，截短型，抗凝血，BloTaq DNA Polymerase